資料-8　培養癌細胞に対する海洋深層水の影響

　

萢浩(琉球大学医学部)

　

1.　実験目的

培地に海ヤカラ1号より取水した深層水、海ヤカラ1号設置海域の表層水を加え、癌細胞の増殖、形態、分子シグナルに対する影響を観察した。

　

2.　実験方法

2.1　海水

海水(SW)は表層水(SSW)、深度600m(DSW-6)、深度1400m(DSW-14)を用い、それらの最終濃度を1%および5%となるよう培地に加えた。

2.2　培養細胞株の種類

人の内膜腺癌細胞株(SAWANO)をRIKEN細胞バンクより購入し、細胞は仔牛血清10%を含む脱イオン水で調整した基礎培地(MEM)で維持したものを用いた。

2.3　実験群と対照

次の各群とした。

(1)　1%、5%表層水

(2)　1%、5%DSW600m

(3)　1%、5%DSW1400m。

対照としては、脱イオン水(DDW)を入れた。

2.4　DSW培地による処置とサンプリング

各群の細胞数を5×10⁴/mlに調整し、径40mmのディッシュに撒き24時間MEMで培養した。培地を新しい培地で置き換えて培養を継続した。その後、一定時間の間隔で細胞を採取し、検索した。

　

3.　実験結果

3.1　細胞の増殖と阻止

1)　細胞増殖曲線

2)　方法：トリパンブルー染色による除外計算

前ページ　　　目次へ　　　次ページ